Tipos pcr

http://es.slideshare.net/adrianamariagil/pcr-y-electroforesis-biociencias-2010-pdf

Tipos de PCR

• PCR anidada

Esta técnica de PCR es muy sensible ya que el producto de una amplificación es utilizado como molde para realizar una segunda amplificación usando cebadores que se ubican dentro de la primera secuencia amplificada.

http://www.elsevier.es/en-revista-gaceta-mexicana-oncologia-305-articulo-herramientas-moleculares-su-utilidad-el-90227012

  

• RT-PCR

El molde inicial es ARN y, mediante el uso de la enzima enzima transcriptasa inversa, se realiza la conversión del ARN a un tipo de ADN llamado ADNc (ADN complementario).
Es especialmente útil cuando solo se dispone de pequeñas cantidades de ARN o se quieren amplificar genes específicos.
Para esta PCR se requieren de dos tipos de cebadores: un cebador denominado Antisentido que inicia la reacción de RT-PCR y el cebador denominado Sentido (sense) que inicia la replicación del ADNc.
La RT-PCR puede ser usada para construir bibliotecas de ADNc.

• PCR tiempo real

Permite cuantificar, la cantidad de ADN o ARN amplificado en cada momento.
Para la detección de la cantidad de ADN específico se emplea una sonda unida a dos fluorocromos que hibrida en la zona intermedia entre el cebador directo (forward) y el inverso (reverse),esta sonda genera fluorescencia por resonancia permitiendo así deducir el nivel de amplificación de la molécula de ADN ya que la fluorescencia emitida es proporcional a la cantidad de producto formado en cada ciclo de PCR.

http://es.slideshare.net/dianyu/pcr-en-tiempo-real?next_slideshow=1

• PCR Multiplex

Tipo de PCR en el cual se amplifica más de una secuencia en una misma reacción incluyendo múltiples pares de primers (hasta 8), que generarán varios productos amplificados visibles como múltiples bandas en un gel, este tipo de PCR es frecuentemente usada en diagnóstico médico.

• PCR in situ

Esta técnica de  PCR se lleva a cabo sobre preparaciones fijas sobre un portaobjetos, por lo que permite realizar la PCR en secciones histológicas o células y que los productos generados puedaa visualizarse en el sitio de amplificación. En la técnica de in PCR-in situ se realiza primero amplificación de ADN blanco y luego detección mediante hibridación in situ convencional con sondas ADN/ARN. De esta manera pueden detectarse cantidades pequeñísimas de genoma.


Fuente:
http://datateca.unad.edu.co/contenidos/201529/Exe_201529/Protocolo_y_modulo/leccin_17_tipos_de_pcr.html